Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy (FLIM) ist ein Fluoreszenz-basiertes bildgebendes Verfahren, das im Gegensatz zur klassischen Fluoreszenzmikroskopie nicht auf einer Messung der Fluoreszenzintensität, sondern zusätzlich die Lebensdauer der angeregten Zustände der Fluorophore bestimmt.
FLIM ermöglicht die Differenzierung von Fluorophoren, die durch starke Überschneidungen in ihren Anregungs- und Emissionswellenlängen charakterisiert sind, sich jedoch in ihren Fluoreszenzlebensdauern deutlich voneinander unterscheiden. Viele Fluorophore ändern zudem abhängig von den Umgebungsbedingungen sehr spezifisch ihre Fluoreszenzlebensdauer. So lassen sich beispielsweise pH-Wert oder Chloridkonzentration mittels FLIM quantitativ analysieren. Auch Förster Resonance Energy Transfer (FRET) Sensoren zeigen unterschiedliche Lebensdauern bei Aktivitätsänderungen und können somit zusätzlich analysiert werden.
