3D Superresolution

TauSTED

Die “Stimulated Emission Depletion (STED) Mikroskopie” ist eine hochauflösende Mikroskopietechnik, die die Auflösungsgrenzen der konventionellen Fluoreszenzmikroskopie unterschreitet. Hierbei wird neben einem konfokalen Anregungslaser ein Abklinglaser eingesetzt, der Fluoreszenz rund um den Fokuspunkt unterdrückt. Die Auflösungsgrenze von 200 nm bei konventionellen Lichtmikroskopieverfahren wird dabei auf bis zu 40 nm verbessert. Die STED-Mikroskopie eignet sich sowohl für fixierte als auch lebende Präparate. Daten können in Echtzeit akquiriert und analysiert werden. Für das Verfahren sind eine Vielzahl von Farbstoffen geeignet, jedoch können speziell optimierte Farbstoffe durch ihre hohe Fotostabilität für bestmögliche Ergebnisse herangezogen werden.

Bei der von Leica entwickelten tau-STED Technologie, werden sowohl die optischen Eigenschaften eines Fluorophors (Fluoreszenzintensität mittels STED), als auch dessen photophysikalische Eigenschaften (FLIM) gemessen, um ein hochauflösendes Bild mit geringeren Laserleistungen und besserem Signal-Rausch Verhältnis zu erzielen.

Vergleich des Auflösungsgewinns einer Aufnahme unter Zuhilfenahme von STED und Tau-STED im Vergleich zu konventioneller konfokal Mikroskopie. Gefärbt sind Kernporen von Cos-7 Zellen mit anti-Nup STAR635P